EGFRvIII et de membres pro-apoptotiques de la famille de protéines Bcl-2. puma a scratch Comme le montre la figure 1a, la majorité de ces lignées cellulaires co-expriment des taux élevés d'EGFR et de trois protéines pro-apoptotiques, à savoir PUMA, Bax et Bmf. En revanche, ces cellules expriment de faibles niveaux de Bad, Bim et Bok. Pour déterminer si EGFRvIII coexprimait également avec des protéines pro-apoptotiques similaires à l'EGFR, nous avons examiné trois xénogreffes de GBM portant l'EGFRvIII.

L'a-tubuline a été déterminée en tant que témoin de charge. Lignées cellulaires: 1, UW14; 2, UW281; 3, MGR1; 4, MGR2; 5, MGR3; 6, T98G; 7, U373MG; 8, UW5; 9, UW15; 10, UW19. Toutes sont des cellules GBM, à l'exception de MGR1 puma a scratch femme et UW5, qui sont des cellules AA. (B) Co-expression de EGFRvIII et de protéines pro-apoptotiques dans des xénogreffes de GBM. Trois xénogreffes de GBM exprimant EGFRvIII, à savoir, D-270 MG, D-317 MG et U87MG-EGFRvIII, ont été examinées pour puma alexander mcqueen déterminer les niveaux de EGFRvIII.

Ensemble, ces résultats indiquent que l'EGFR et l'EGFRvIII coexpriment de manière paradoxale avec des protéines pro-apoptotiques et interagissent spécifiquement avec PUMA dans le GBM humain.En utilisant une cohorte de 101 gliomes et 12 tissus cérébraux normaux, nous avons examiné les taux d'EGFR / EGFRvIII et de PUMA via l'IHC. Les résultats indiquent une corrélation positive significative entre les niveaux d'expression de EGFR / EGFRvIII et de PUMA (p = 0,039). Comme puma amg le montre la figure 2a.

Un gliome de grade II (panneau inférieur) se colorent négativement pour les deux protéines. L'anticorps utilisé dans l'IHC EGFR / EGFRvIII reconnaît un épitope C-terminal présent dans les récepteurs EGFR et EGFRvIII, et des coupes tumorales consécutives ont été utilisées dans ces études. Le degré élevé de co-expression de EGFR / EGFRvIII-PUMA dans des échantillons de GBM primaires est cohérent avec les observations de la figure 1 avec les lignées cellulaires de GBM.

Conformément aux résultats de la figure S1, il a été constaté qu'une sous-population de GBM exprimait PUMA, mais pas des niveaux substantiels d'EGFR / EGFRvIII.EGFR / EGFRvIII et PUMA co-expriment dans des échantillons primaires de GBM et l'étendue de la co-expression est significativement corrélée au degré de gliome. de manière puma beige significative avec PUMA dans les GBM primaires. Une cohorte de 101 gliomes et 12 tissus cérébraux normaux a été soumise à une coloration IHC pour EGFR / EGFRvIII et PUMA.

Panneau supérieur: un GBM primaire coloré positivement pour EGFR / EGFRvIII et PUMA. Panneau inférieur: gliome de grade II présentant une coloration négative pour les deux protéines. Des sections tumorales consécutives ont été utilisées dans ces études.Pour déterminer si PUMA est essentiel pour l'induction de l'apoptose dans les GBM, un ARNsi spécifique de PUMA a été utilisé pour réguler négativement la transcription de PUMA et la réponse des cellules U87MG GBM.